生物潔凈室如何進(jìn)行動(dòng)態(tài)監測
潔凈室是空氣懸浮粒子濃度受控的房間，對空氣潔凈度、溫度、濕度、壓差、噪聲等參數根據需要都進(jìn)行控制的密閉性較好的空間。分為工業(yè)潔凈室和生物潔凈室，生物潔凈室關(guān)注的是空氣中懸浮粒子和浮游jun數量，需要對其進(jìn)行嚴格管控，特別是無(wú)jun制藥的潔凈室，需要進(jìn)行實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)監測，配備實(shí)時(shí)粒子計數器和浮游jun采樣儀。那么，動(dòng)態(tài)監測需要檢測哪些項目，對應的標準又是怎樣的呢？
1、實(shí)施動(dòng)態(tài)監測的意義和作用
在A/B 級潔凈區中，實(shí)施動(dòng)態(tài)監測是為人員行為評價(jià)、產(chǎn)品放行提供必要的依據，以便及時(shí)發(fā)現其中存在的問(wèn)題，并及時(shí)采取有效的措施解決問(wèn)題，以防**影響進(jìn)一步擴大，同時(shí)，也為空氣平衡、人員行為和房間消du方法的進(jìn)一步改進(jìn)提供了依據。
2、動(dòng)態(tài)監控項目和標準
2.1 監測的項目
在生產(chǎn)操作前，要檢查、控制好區域內的溫度、濕度和壓差；在生產(chǎn)過(guò)程中，要監測沉降jun、浮游jun、懸浮粒子和風(fēng)速等情況；在關(guān)鍵操作完成后，要監測設施、設備的表面和人員衛生狀況。同時(shí)，在生產(chǎn)開(kāi)始前后，都要檢測隔離操作手套。
2.2 溫度、濕度監測
例如，中溫型微生物在25～30 ℃生長(cháng)適宜；濕生型微生物在濕度為70%～90%的環(huán)境下生長(cháng)、繁殖比較旺盛，因此，一般需要避開(kāi)此溫度、濕度范圍。同時(shí)，溫度、濕度過(guò)高或過(guò)低，對人體的舒適度、人員的工作情緒等都有很大的影響，進(jìn)而還會(huì )嚴重影響A/B 級區人員的操作行為，無(wú)法有效確保產(chǎn)品的**性。一般情況下，無(wú)jun制劑生存環(huán)境的溫度應控制在18～24 ℃、濕度應控制在45%～65%。
2.3 相對壓差監測
不同潔凈度等級的潔凈區之間和潔凈區與非潔凈區之間的空氣靜壓差應大于10Pa，應裝有指示壓差的裝置；容易產(chǎn)生粉塵的生產(chǎn)區域應與相鄰的室（區）保持相對負壓；相同潔凈度級別的不同功能區（操作間）之間，應保持適當的壓差梯度。目前，常用的壓差表量程在0～60Pa之間，負壓的壓差表量程一般選擇在-30～30Pa之間，所以，在日常生產(chǎn)過(guò)程中，應對儀器、儀表本身的校驗或校正情況加強監督和管理，因為壓差可以增加異常報jing的情況。但是，為了避免正常操作（比如開(kāi)門(mén)）造成的報jing，可以適當增加報jing延時(shí)裝置，具體的延時(shí)時(shí)間可以根據不同人員的開(kāi)門(mén)、進(jìn)入或物料轉運、關(guān)門(mén)所需時(shí)間驗證得出。
2.4 粒子和微生物監測潔凈區的設計
須符合相應的潔凈度要求，達到“靜態(tài)”和“動(dòng)態(tài)”的標準，同時(shí)，該區還應當動(dòng)態(tài)監測微生物（浮游jun、沉降jun、表面微生物）的情況。
微生物主要包括病du、立克次體、細jun、jun類(lèi)和原生蟲(chóng)類(lèi)等，與潔凈室有關(guān)的主要是細jun和jun類(lèi)。細jun不能單獨生存，因此可以通過(guò)空調的初效、中效、（亞）高效過(guò)濾阻隔塵埃粒子，同時(shí)也能完成對細jun的阻隔。對無(wú)jun區來(lái)說(shuō)，微生物檢測更重要，但是直接檢測的周期長(cháng)。所以，可以用粒子水平來(lái)間接衡量其具體的情況。這兩方面的檢測可以為無(wú)jun生產(chǎn)過(guò)程環(huán)境的破壞度和衛生狀況作評估，為產(chǎn)品的放行提供數據支持。
3、動(dòng)態(tài)監測的方法和注意點(diǎn)
3.1 懸浮粒子
目前，懸浮粒子的測定方法主要有顯微鏡法和自動(dòng)粒子計數法兩種，而用于潔凈區空氣懸浮粒子監測的儀器多為光散射粒子計數器和激光粒子計數器。綜合實(shí)際情況，建議在A 級區內采用連續監測系統檢測空氣懸浮粒子。在線(xiàn)監測系統可以實(shí)時(shí)反饋監測信息，以便監控人員及時(shí)提出解決其中存在問(wèn)題的方法。比如，提醒操作人員減緩動(dòng)作幅度，為環(huán)境清潔、消du、停機等待等生產(chǎn)過(guò)程控制提供依據。與此同時(shí)，還要為空調過(guò)濾器的日常檢查、維護建立一套完善的操作、檢測、更換程序。只有這樣做，才能有效地控制其中存在的風(fēng)險。
3.2 浮游菌
經(jīng)常使用撞擊法中的狹縫式采樣器監測浮游菌采樣器，通過(guò)多孔蓋抽取空氣，而氣流中的微生物則撞擊附著(zhù)在標準培養皿中瓊脂培養基的表面。通常情況下，在測定浮游菌時(shí)，每個(gè)采樣點(diǎn)的取樣量不得少于1m3，而在生產(chǎn)過(guò)程中，可以設定采樣器，利用采樣、等待、再采樣的間隙方式監測生產(chǎn)全過(guò)程。另外，浮游菌采樣器還有篩孔撞擊式、表面真空取樣、離心式、過(guò)濾式和液體沖擊式等采樣方式。
3.3 沉降菌
沉降jun是用暴露法收集降落在培養皿中的活生物性粒子，并將其培養、繁殖后加以計數所得。沉降菌測定的培養皿應布置在有代表性的地方和氣流擾動(dòng)小的地方。具體的采樣方法和培養方法是，將培養皿放置在接近于操作高度的位置后，打開(kāi)外蓋并倒扣放置，使培養基表面暴露出來(lái)。在靜態(tài)監測時(shí)，培養皿應放置不少于30min 后再將外蓋蓋上收集；在動(dòng)態(tài)監測時(shí)，暴露時(shí)間應根據沉降碟本身和環(huán)境兩方面因素驗證所得，單個(gè)沉降碟的暴露時(shí)間可以少于4h，但是，不得超過(guò)4h。在同一位置，可以使用多個(gè)沉降碟連續監測并累積計數，然后收集，酵母jun和霉jun通常在20～25 ℃的條件下培養5～7d后計數，而需氧jun通常在30～35 ℃的條件下培養48～72h 后計數。沉降碟以其價(jià)廉、輕便、對空氣環(huán)境破壞較小等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應用于潔凈區環(huán)境檢測中。但是，在使用沉降碟時(shí)，應先確認沉降碟的暴露時(shí)間（記下平皿打開(kāi)和結束的時(shí)間），以使暴露后的培養基不會(huì )因失水等原因而影響微生物的正常生長(cháng)。目前，好多廠(chǎng)家的培養皿是本廠(chǎng)自配的，密封性沒(méi)有購買(mǎi)的培養皿強，在生產(chǎn)過(guò)程中，轉運會(huì )對培養皿本身造成污染，使所得的結果出現假陽(yáng)性。所以，建議在生產(chǎn)過(guò)程中，應使用培養皿本身的空白對照或購買(mǎi)密封性好的培養皿，以提高檢測結果的可信度。
3.4 物體表面微生物測試
物體表面微生物測試可以確定物體（包括工作服）表面微生物的污染程度。一般情況下，可以使用棉簽間接取樣后培養、直接接觸法取樣和表面沖洗法3種方法，而利用直接接觸法時(shí)，所用的接觸碟要放置至室溫后使用。
3.4.1 棉簽擦拭表面取樣方法
棉簽擦拭表面取樣方法的取樣面積一般為25cm2，人體表面擦拭至少應包括雙手手指印、頭、口罩、肩部、前臂、手腕和腿等。棉簽間接取樣適用于不規則表面，取樣時(shí)，手握住拭子柄，以30°角與取樣表面接觸，采用S 型或Z 型緩慢并旋轉棉簽充分擦拭。如果拭子頭為藻酸鈣材料，則要用稀鹽酸溶液作為稀釋劑（比如質(zhì)量分數為1%的檸檬酸鈉溶液），這樣才能讓拭子頭完全溶解。
3.4.2 直接接觸法
直接接觸法是將接觸碟直接接觸需采樣的物體表面，接觸時(shí)間一般在10s左右，培養后便會(huì )長(cháng)出jun落。因為該方法容易操作而且可以定量，所以被廣泛使用。但是，這個(gè)測試只適用于平整光滑的表面，通常在灌封或灌裝后清場(chǎng)前取樣。取樣后，需用蘸有質(zhì)量分數為75%的乙醇的紗布擦拭被取樣表面，以除去殘留。將取樣后并做好標記的接觸碟置于培養箱中培養，培養箱的參數一般設定在30～35 ℃，培養72h后計數。
3.4.3 表面沖洗法
表面沖洗法適用于監測大面積區域內表面的微生物含jun量，包括設備軌道、儲水罐等。用定量的無(wú)jun水沖洗表面，收集淋洗水，用膜過(guò)濾法計算微生物的數量。
3.5 風(fēng)速測試檢測
生產(chǎn)過(guò)程中A 級區的風(fēng)速，使生產(chǎn)環(huán)境的風(fēng)速符合指導值（0.36～0.54 m/s），同時(shí)，還可以判斷層流是否開(kāi)啟、是否正常運行、是否被堵或泄漏，使生產(chǎn)環(huán)境達到要求。目前，由于安裝的隔離器密閉性良好，所以，經(jīng)過(guò)相應的驗證，也可以適當地降低層流風(fēng)速。部分文獻指出，A 級區可以選擇正壓無(wú)jun紊流的流型，不一定都要選擇層流流型。
3.6 隔離操作器手套的檢測
目前，檢測手套時(shí)一般采用完整性檢測，對其內部施加一定的壓力，在規定時(shí)間內，壓力降低值在可接受范圍內即視為合格。另外，還可以在每個(gè)班次生產(chǎn)前后，增加手套目檢程序等。檢測周期要根據產(chǎn)品的特點(diǎn)、設備和班次安排等因素驗證得出。
4、日常監控取樣點(diǎn)和取樣頻次
由于關(guān)鍵點(diǎn)的位置作為取樣點(diǎn)并不一定適用，所以，須考慮環(huán)境監測會(huì )不會(huì )加大產(chǎn)品污染風(fēng)險的概率。比如懸浮粒子的取樣點(diǎn)，一般布置在距離地面0.8～1.5m 的位置，盡量避免在回風(fēng)口附近取樣，而且測試人員應站在取樣口的下風(fēng)側等。潔凈區監測中的取樣點(diǎn)和取樣量可以比潔凈區級別確認時(shí)的取樣點(diǎn)和取樣量少，通過(guò)驗證確定取樣點(diǎn)，且其要通過(guò)風(fēng)險分析研究和監測結果分析（至少要有6 個(gè)月以上的運行數據作為分析的基礎）。監測頻次問(wèn)題也是一個(gè)值得深思的課題，監測頻次不夠，就不能很好地反映其中存在的問(wèn)題——監測頻次過(guò)多，不利于資源優(yōu)化。因此，監測頻次的確定一般使用風(fēng)險數值分布（RNR），即風(fēng)險發(fā)生的嚴重性（SEV）與風(fēng)險發(fā)生的可能性（OCC）的乘積。根據風(fēng)險數值的大小確定不同的監測頻率，同時(shí)，也要建立切實(shí)可行的措施降低其中的風(fēng)險。
5、一般超標處理方法和報告打印
在日常監測過(guò)程中，如果監測數據出現偏差時(shí)，其數據就會(huì )高于設定的限度，所以，須通過(guò)CAPA（預防和糾正措施）調查發(fā)生了什么，如何防止該問(wèn)題再次發(fā)生，而偏差及其后續措施都必須有相應的記錄。所以，要從人、機、料、法、環(huán)、測六個(gè)方面分析問(wèn)題，運用風(fēng)險評估工具排查風(fēng)險點(diǎn)，找出要因，制訂切實(shí)可行的措施來(lái)解決問(wèn)題，同時(shí)，還可以做必要的培訓、考核和評估工作，以便從根本上解決問(wèn)題。在日常監測過(guò)程中，每一批報告都要打印出，并附入相應批的生產(chǎn)記錄中。生產(chǎn)時(shí)間一般可以分為準備、自?xún)?、生產(chǎn)和清場(chǎng)4個(gè)階段，但是，報告打印的時(shí)間要包括環(huán)境的自?xún)魰r(shí)間和生產(chǎn)時(shí)間，并要備注解釋監測超常和超標結果，從而使產(chǎn)品生產(chǎn)情況的可追溯性。
6、結論
隨著(zhù)藥品監管力度的加大，市場(chǎng)要求的增強，藥品生產(chǎn)企業(yè)必需嚴控生產(chǎn)全過(guò)程，尤其是無(wú)jun藥品的生產(chǎn)全過(guò)程。自動(dòng)化技術(shù)的應用，使藥品生產(chǎn)線(xiàn)無(wú)人化操作逐步成為可能；無(wú)jun隔離器的使用，讓關(guān)鍵工序無(wú)人操作成為了可能。但目前國內隔離操作器的使用還存在一些缺陷，比如，在線(xiàn)監測培養皿放入和取出的過(guò)程，手套在線(xiàn)更換執行困難，系統存在泄漏時(shí)，應急處理措施缺失等。針對這些問(wèn)題，需要進(jìn)行更為系統的研究。同時(shí)，應用動(dòng)態(tài)監測系統可以實(shí)時(shí)提供數據、報警信息，方便及時(shí)控制生產(chǎn)過(guò)程，采取有效的手段解決生產(chǎn)過(guò)程中存在的問(wèn)題。另外，應用在線(xiàn)監測系統，可以減少對生產(chǎn)環(huán)境造成的污染，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。
宏瑞科技自1993年成立至今，一直致力于激光塵埃粒子計數器的研發(fā)與生產(chǎn)，包括小流量激光塵埃粒子計數器、大流量激光塵埃粒子計數器與雙流量激光塵埃粒子計數器，在諸如藥廠(chǎng)、電子廠(chǎng)等潔凈室的動(dòng)態(tài)監測和靜態(tài)檢測過(guò)程中都需要用到，如動(dòng)態(tài)監測時(shí)所需的“潔凈環(huán)境在線(xiàn)監測系統”，靜態(tài)檢測時(shí)的“風(fēng)量罩”“壓差儀”“塵埃粒子計數器”“浮游菌采樣器”等。而宏瑞科技作為已生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)近30年的潔凈環(huán)境設備生產(chǎn)廠(chǎng)家，可為您提供全系列的檢測儀器和技術(shù)支持！
